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關(guān)節(jié)炎模型誘導(dǎo)用膠原（Collagen）產(chǎn)品專題

（Collagen Induced Arthritis(CIA)膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎）

文章關(guān)鍵詞：

Arthritis 關(guān)節(jié)炎；Incomplete Freund's Adjuvant (IFA) 弗氏不*佐劑；Complete Freund's Adjuvant (CFA) 弗氏*佐劑；Type II Collagen II型膠原；Chondrex Inc.;

背景描述：

【膠原Collagen】Chondrex Inc.提供各種物種和類型的高度純化的II型膠原、IX型和XI型軟骨膠原，用于建立CIA（膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎）模型。CIA可通過II型膠原在嚙齒類動(dòng)物和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物中誘導(dǎo)而成，但有文獻(xiàn)報(bào)道，XI型膠原也能誘導(dǎo)小鼠和大鼠的關(guān)節(jié)炎模型，因?yàn)閄I型膠原的α3（XI）鏈與II型膠原的α1（II）鏈一致。另外，IX型膠原的自發(fā)性抗體也有助于小鼠多軟骨炎發(fā)病?？蒲腥藛T需根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇合適的膠原物種和類型。

【佐劑Adjuvant】膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（CIA）能在某些小鼠、大鼠和非人哺乳動(dòng)物品系中成功誘導(dǎo)，通過將II型膠原與佐劑混合免疫的方法。為了成功誘導(dǎo)動(dòng)物CIA，用來乳化膠原的佐劑類型至關(guān)重要。Chondrex Inc.提供不*佐劑和含各種濃度滅活結(jié)核分枝桿菌的*佐劑從而能用于優(yōu)化CIA免疫條件。

成功建模需考慮的幾大重要因素：

一、供體動(dòng)物（Animal Vendors）

二、飼養(yǎng)條件（Housing Conditions）

三、動(dòng)物年齡和品系（Animal Age&Strains）

A）小鼠（Mouse）

【年齡Age】：選擇至少7-8周齡，具成熟免疫系統(tǒng)的小鼠。老化的小鼠可能呈低發(fā)病率和低惡化程度。

【品系Strains】：膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（CIA）模型的敏感程度與MHC-class II分子有關(guān)，其對(duì)免疫用II型膠原產(chǎn)生反應(yīng)。詳見【表1.建立CIA模型的常用大鼠和小鼠品種】。

DBA/1 (H-2q)和B10.RIII (H-2r)小鼠對(duì)CIA敏感型很高，DBA/1小鼠對(duì)雞，牛和豬來源的II型膠原有反應(yīng)，B10.RIII對(duì)牛和豬來源的II型膠原有反應(yīng)，但是對(duì)雞II型膠原反應(yīng)很弱。

DBA/1 (H-2q)和B10.RIII (H-2r)小鼠對(duì)小鼠II型膠原反應(yīng)很弱。即使用大量的小鼠II型膠原來免疫，CIA發(fā)病率仍非常低，約10%。

另外，一些CIA耐性小鼠品種能夠用來產(chǎn)生致關(guān)節(jié)炎抗體，說明CIA不僅是受限制于MHC類型。比如，IFN-γ或IL-10敲除的CIA抗性品種C57BL/6，129/Sv (H-2b)和Balb/c (H-2d)小鼠能夠產(chǎn)生致關(guān)節(jié)炎自抗體和關(guān)節(jié)炎，這表明關(guān)節(jié)炎的敏感性也受細(xì)胞因子的高度調(diào)控。

B）大鼠（Rat）

【年齡Age】：選擇至少7-8周齡，具成熟免疫系統(tǒng)的大鼠。

【品系Strains】：高敏感大鼠品系（Sprague-Dawley (SD)(RT1f), Wistar (RT1u)(1), BioBreeding/Diabetes-resistant (BB/DR)(RT1u) (9), Wistar Furth (RT1u), Louvain (LOU) (RT1u), Osborne-Mendal (OM) (RT1u), and Lewis (LEW) (RT1l) rats）；

BB大鼠是用來建立CIA的品種。Dark Agouti (DA)大鼠對(duì)CIA高度敏感，但對(duì)油誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型（礦物油：IFA，單獨(dú)）低敏感。因此，DA大鼠的CIA模型可能同時(shí)表現(xiàn)出兩種不同病理機(jī)制。因此，DA大鼠不建議用來建立CIA模型。

四、佐劑（Adjuvant）

A）小鼠（Mouse）

弗氏*佐劑（CFA）包含高質(zhì)量的結(jié)核分枝桿菌，對(duì)誘導(dǎo)嚴(yán)重的小鼠關(guān)節(jié)炎是必要的，因其能誘導(dǎo)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)。不同于大鼠，將II型膠原和不*佐劑（IFA）乳化在一起不會(huì)產(chǎn)生關(guān)節(jié)炎。

強(qiáng)烈的抗體反應(yīng)和正確的抗體亞型對(duì)誘導(dǎo)小鼠關(guān)節(jié)炎很重要?？贵w產(chǎn)生取決于抗膠原IgG2a和IgG2b亞型水平，它們能活化補(bǔ)體，誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎的必要步驟。研究顯示，含5mg/ml結(jié)核分枝桿菌的CFA能成功誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎，呈高致病率（50-70%），即使是CIA耐性小鼠品種，比如C57BL/6，B10，129/Sv小鼠（H-2b）。

B）大鼠（Rat）

因大鼠通常對(duì)佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（AIA）很敏感，不*氟氏佐劑（IFA）可用于建模。

五、膠原（Collagen）

使用高純度的天然II型膠原。去糖基化和變性的膠原都會(huì)影響致關(guān)節(jié)炎性，微弱污染比如胃蛋白酶在T細(xì)胞刺激反應(yīng)中可能會(huì)引起假陽性反應(yīng)。

膠原產(chǎn)品訂購：美國(guó)Chondrex原裝，基本現(xiàn)貨提供，咨詢價(jià)格和貨期，及技術(shù)問題。

操作流程詳見說明書：

Mouse Collagen-Induced Arthritis Protocol

Rat Collagen-Induced Arthritis Protocol

佐劑產(chǎn)品訂購：美國(guó)Chondrex原裝，基本現(xiàn)貨提供，咨詢價(jià)格和貨期，及技術(shù)問題。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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