Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表
簡要描述：
Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表達分析，是一款專門設(shè)計用于酵母轉(zhuǎn)化和文庫篩選的試劑盒，比目前商業(yè)或公開的文獻方法更快捷和更有效。本試劑盒制備的酵母細胞可立即用于轉(zhuǎn)化或凍存待用（≤ -70°C）。
產(chǎn)品時間：2017-09-02
打印當前頁Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™
Frozen-EZ酵母轉(zhuǎn)化試劑盒
【溫馨提示】：
見我司懋康生物整理的酵母雙雜交檢測（Yeast two-hybrid assay）產(chǎn)品專題。
基本描述
Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母轉(zhuǎn)化試劑盒）是一款專門設(shè)計用于酵母轉(zhuǎn)化和文庫篩選的試劑盒，比目前商業(yè)或公開的文獻方法更快捷和更有效。本試劑盒制備的酵母細胞可立即用于轉(zhuǎn)化或凍存待用（≤ -70°C）。本試劑盒制備的細胞適用于環(huán)形和線性DNAs轉(zhuǎn)化，同時也能用于其他真菌包括C. albicans，S. pombe和P. pastoris的轉(zhuǎn)化。
產(chǎn)品亮點：
- 高轉(zhuǎn)化效率：每µg質(zhì)粒DNA（環(huán)形）可產(chǎn)生105 - 106個酵母轉(zhuǎn)化子；
- 制備好的感受態(tài)細胞可凍存后待用；
- 快速簡單步驟于10min內(nèi)可制備酵母感受態(tài)細胞；
- 簡單單一步驟，1h內(nèi)完成轉(zhuǎn)化；
- 適用菌株類型廣（S. cerevisiae, C. albicans, S. pombe, Pichia pastoris）；
- 簡單方法用于多質(zhì)粒轉(zhuǎn)化；
產(chǎn)品組分：本試劑盒可做120個常規(guī)轉(zhuǎn)化或600個微量轉(zhuǎn)化實驗。試劑盒4℃一年有效。
組分 | 規(guī)格 | 保存 |
EZ1 Solution | 60ml | 0-4℃ |
EZ2 Solution | 6ml | 0-4℃ |
EZ3 Solution | 60ml | 0-4℃ |
操作流程【見下圖】：
A，感受態(tài)細胞制備
30℃，于10ml YPD肉湯培養(yǎng)酵母菌直至中數(shù)量級（~5 x 106-2 x107 cells/ml 或OD600= 0.8-1.0）。以下步驟室溫進行。
A1，500 x g離心細胞4min，吸掉上清液；
A2，加入10ml EZ1溶液清洗沉淀。重新離心沉淀細胞，吸掉上清液；
A3，加入1ml EZ2溶液重懸沉淀細胞。
此時獲得的感受態(tài)細胞即可直接用于轉(zhuǎn)化或凍存?zhèn)溆茫?/span>≤ -70°C）。注意需緩慢凍存細胞，不可使用液氮瞬間凍存細胞。
B，轉(zhuǎn)化
以下步驟適用于新鮮制備和凍存（室溫融化）的酵母感受態(tài)細胞。
B1，取50µl感受態(tài)細胞與0.2-1µg DNA（體積少于5µl）混合；加入500µl EZ3溶液，*混合；
B2，30°C孵育45min，孵育過程中用手指輕彈或低速渦旋（如果適用于轉(zhuǎn)化DNA）2-3次讓其混勻；
B3，從上面轉(zhuǎn)化混合液中取50-150µl到適當平板上，沒有必要沉淀或清洗細胞。、
B4，30°C孵育平板2-4天使得轉(zhuǎn)化子生長。
訂購信息：Zymo Research原裝正品，現(xiàn)貨供應。咨詢，，：。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格（元） |
T2001 | Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母轉(zhuǎn)化試劑盒） | 120 Rxns | 咨詢 |
T2001 Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ User Manual
引用文獻：
Plasmids were transformed with high efficiency using the Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ in the construction of synthetic yeast promoters. Researchers showed that decreasing nucleosome affinity correlated with increasing promoter strength and expression levels higher than native species. |
Curran KA, et. al. (2014) Design of synthetic yeast promoters via tuning of nucleosome architecture. Nat Commun. 5:4002. |
The Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit was used to integrate various TEF1 promoter mutants upstream of a gene in Saccharomyces cerevisiae. Efficient transformation allowed comparison of gene activity and, therefore, determination of promoter strength. |
Nevoigt, E., et al. (2006) Engineering of promoter replacement cassettes for fine-tuning of gene expression in Saccharomyces cerevisiae. Appl Environ Microb, 72(8): 5266-5273. |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表達分析
Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表達分析
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