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Phalloidin  iFluor 標記鬼筆環(huán)肽熒光探針

Phalloidin iFluor 標記鬼筆環(huán)肽熒光探針

簡要描述:

Phalloidin iFluor 標記鬼筆環(huán)肽熒光探針 790標記鬼筆環(huán)肽近紅 Actin熒光探針與細胞染色,又稱鬼筆鵝膏素,Z初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)中分離到的一種七肽毒素,以*的親和力和特異性結(jié)合肌動蛋白絲F-actin(聚合形式的肌動蛋白),不會結(jié)合單體肌動蛋白(G-actin)。

產(chǎn)品時間:2024-03-26

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iFluor 790 Phalloidin iFluor 790標記鬼筆環(huán)肽


產(chǎn)品標簽

Phalloidin 鬼筆環(huán)肽;F-actin 肌動蛋白(聚合);G-actin 球形肌動蛋白(單體);Actin Polymerization 肌動蛋白聚合;Cytochalasin細胞松弛素;CAS NO.17466-45-4;


產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

iFluor 790 Phalloidin iFluor 790標記鬼筆環(huán)肽

MX4415-300T

300T

4188

【溫馨提示】:見我司整理的鬼筆環(huán)肽及衍生物(Phalloidin and Phalloidin Conjugates)產(chǎn)品專題。


產(chǎn)品描述

鬼筆環(huán)肽(Phalloidin),又稱鬼筆鵝膏素,zui初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)中分離到的一種七肽毒素,以*的親和力和特異性結(jié)合肌動蛋白絲F-actin(聚合形式的肌動蛋白),不會結(jié)合單體肌動蛋白(G-actin)。不像肌動蛋白抗體,同時識別單體和聚合形式的肌動蛋白。鬼筆環(huán)肽對大小纖維的親和力相近,在許多不同的動植物物種的肌肉和非肌肉細胞中,基本都按照一個肌動蛋白亞基與一個鬼筆環(huán)肽分子的化學(xué)計量比結(jié)合。不像肌動蛋白抗體,對不同物種或來源的肌動蛋白親和力會發(fā)生明顯變化。鬼筆環(huán)肽的非特異性結(jié)合幾乎可忽略,染色和未染色區(qū)域的差異極其明顯。鬼筆環(huán)肽使得肌動蛋白聚合/解離的臨界濃度降至1μg/ml,可用作一種聚合增強劑。另外,產(chǎn)生的復(fù)合物高度穩(wěn)定(解離常數(shù)約3×10–8 M),能夠抑制細胞松弛素、典化鉀和溫度上升引起的去聚合和去組裝活性。

鬼筆環(huán)肽及其衍生物在納摩爾濃度即可對F-actin染色,且水溶性良好,是非常實用和方便的探針,對組織切片、細胞培養(yǎng)物或無細胞體系內(nèi)的F-actin進行定性和定量研究。另外,鬼筆環(huán)肽及其衍生物很小,直徑約12–15 ?,分子量<2000 Da,經(jīng)標記后的F-actin仍維持許多標記前的功能。比如,標記的甘油抽提肌纖維仍能收縮;標記的肌動蛋白絲仍能在固相肌球蛋白基質(zhì)中移動。

本品為iFluor 790 熒光標記的鬼筆環(huán)肽(iFluor 790-Phalloidin),以凍干粉形式提供。按照100µl/孔(96孔板),總共可做300次。


產(chǎn)品特點

1)選擇性染色F-actin,優(yōu)于抗體染色法,具更高的特異性和更低的非特異背景。

2)優(yōu)秀的熒光亮度和穩(wěn)定性,類同于Alexa Fluor 790-Phalloidin,Ex/Em=787/808nm。

3)優(yōu)化用于固定和透化處理樣本。

4)適用于多重標記應(yīng)用,與其他熒光染料包括熒光蛋白、Qdot熒光納米晶和其他包括二抗在內(nèi)的熒光偶聯(lián)物*兼容。


注意事項

1)本品具有一定的毒性,LD50=2mg/kg,操作時請注意防護。

2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


操作流程(免疫熒光染色)【詳見懋康整理】

有幾種方法都能用來染色組織細胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動蛋白絲(F-actin染色,其中,固定步驟在獲得可信且具代表性的細胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實驗自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。

一、實驗材料準備

二、染色工作液準備

三、染色流程(以96孔板為例)

3.1 用黑框/透明底的96孔板進行細胞培養(yǎng),使其貼壁生長達到70-80%的匯合度。

3.2 吸掉培養(yǎng)液,用37℃預(yù)熱的1×PBS BufferpH 7.4)清洗細胞2次。

3.3 用溶于PBS4%多聚甲醛固定細胞,室溫固定10-30min。【注意】:固定過程中甲醇能破壞肌動蛋白,因此,固定液中避免接觸任何甲醇。的固定液是無甲醇的甲醛。

3.4 1×PBS Buffer清洗細胞2-3次,室溫下30s/次。

3.5 用破膜緩沖液透化細胞,室溫處理5min

3.6 1×PBS Buffer清洗細胞2-3次,室溫下30s/次。

3.7 100μl 現(xiàn)配的iiFluor 790 Phalloidin染色工作液到每個孔內(nèi),室溫避光孵育30-90min。

【注意】:若有需要,此時可加入即用型DAPI染色液或其他不同于iFluor 488熒光光譜的細胞核染色液

3.8 1×PBS Buffer清洗細胞2-3次,室溫下30s/次。

3.9 加抗熒光淬滅劑(如Fluoromount-GTM,Cat# MM1401)到孔內(nèi)保護熒光。

3.10 熒光顯微鏡下觀察染色結(jié)果,選擇iFluor 790激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=787/808nm)。若做細胞核染色,選擇合適濾片,比如DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=364/454nm)。


相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

Ex/Em

分子量

MX4401-1MG

Phalloidin

1mg

N/A

~788.87

MX4402-1MG

Amino Phalloidin

1mg

N/A

~901.91

MX4403-300T

FITC Phalloidin

300T

492/518

~1100

MX4405-300T

TRITC Phalloidin

300T

546/575

~1000

MX4407-1MG

5-TAMRA Phalloidin

1mg

546/575

~1200

MX4408-300T

iFluor™ 350 Phalloidin

300T

353/442

~1000

MX4409-300T

iFluor™ 405 Phalloidin

300T

400/421

~1400

MX4410-300T

iFluor™ 488 Phalloidin

300T

492/518

~1900

MX4411-300T

iFluor™ 555 Phalloidin  

300T

556/574

~1300

MX4412-300T

iFluor™ 594 Phalloidin

300T

590/618

~1600

MX4413-300T

iFluor™ 647 Phalloidin

300T

650/665

~2200

MX4414-300T

iFluor™ 680 Phalloidin

300T

681/698

~2700

MX4415-300T

iFluor™ 790 Phalloidin  

300T

787/808

~2800

— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。


Phalloidin  iFluor 標記鬼筆環(huán)肽熒光探針

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