Trypsin 1:250
簡要描述:
Trypsin 1:250 豬源胰蛋白酶1:250 細(xì)胞分離與流式分析,CAS:9002-07-7,來源于胰腺的一種絲氨酸蛋白酶,由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽,底物特異性是帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側(cè)鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端,當(dāng)兩者之一緊隨為脯氨酸的情況除外。另外,當(dāng)切割位點任一邊緊鄰酸性殘基,胰酶水解速率也會減緩。
產(chǎn)品時間:2024-03-21
Trypsin 1:250, Powder (Porcine)
豬源胰蛋白酶1:250(粉末)
產(chǎn)品標(biāo)簽
Trypsin 1:250 胰酶;Collagenase NB 4 膠原酶NB4(標(biāo)準(zhǔn)級別);Trypsin-EDTA (0.25%);Dispase II 中性蛋白酶;Roche;CAS:9001-12-1;
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Trypsin 1:250 (Porcine) 豬源胰蛋白酶1:250(粉末) | MX2002-25G | 25g | 135 |
Trypsin 1:250 (Porcine) 豬源胰蛋白酶1:250(粉末) | MX2002-100G | 100g | 360 |
產(chǎn)品描述
胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),CAS:9002-07-7,來源于胰腺的一種絲氨酸蛋白酶,由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽,底物特異性是帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側(cè)鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端,當(dāng)兩者之一緊隨為脯氨酸的情況除外。另外,當(dāng)切割位點任一邊緊鄰酸性殘基,胰酶水解速率也會減緩。
胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),以無活性的胰蛋白酶原(Trypsinogen)形式分泌于胰腺中,通過切割其末端六肽而得到活化,產(chǎn)生天然單鏈形式的β-胰酶(β-Trypsin),隨后進行有限的自發(fā)裂解產(chǎn)生具水解活性的α-Trypsin(由二硫鍵共價連接的二條肽鏈組成)。胰酶水解活性可被多種化合物所抑制,有1)來源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制劑;2)銀離子;3)有機磷化合物,如氟磷酸異丙酯DFP;4)特定蛋白酶抑制劑,如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等;
本品是來源于豬胰腺的胰蛋白酶凍干粉,經(jīng)γ射線處理滅活病毒,經(jīng)過豬細(xì)小病毒和支原體檢測?;跇?biāo)準(zhǔn)測定方法的酶活力為250 units/mg,即1:250。廣泛用于細(xì)胞傳代,對貼壁細(xì)胞進行消化以制備單細(xì)胞懸液,常用的工作濃度是0.025-0.5%(w/v)。也可聯(lián)合其他蛋白酶如膠原酶、彈性蛋白酶一起使用,以消化組織。
產(chǎn)品特性
- EC NO:3.4.21.4
- CAS NO:9002-07-7
- 同義名:Trypsin, from Porcine Pancreas; Trypsin Powder, Porcine 1:250; Tryptase; Tryptar; Cocoonase; Parenzyme; Parenzymol;
- 分子量:23.4 kDa
- 螯合劑:無EDTA
- 酚紅指示劑:無酚紅
- 外觀:白色至類白色粉末
- 溶解性:溶于水,幾乎不溶于乙醇和甘油
- zuijia工作溫度:37°C
- zuijia工作pH:7.0-9.0
- 酶活性:根據(jù)美國藥典專論規(guī)定的胰蛋白酶活性測定條件(25°C 10 min, pH 7.6),1 g 胰蛋白酶能消化 250 g 酪蛋白底物。
使用方法
1. 胰酶儲存液(2.5%,w/v)的配制
1.1 稱取2.5g胰酶粉末溶于100ml 不含鈣鎂的平衡鹽緩沖液,如HBSS(Hank′s Balanced Salt Solution),并調(diào)整pH在7.4-7.6,此時得到的即2.5%胰酶儲存液,置于4℃短時間保存,3個月相對穩(wěn)定。建議分裝凍存,利于長期保存。解凍后可能會出現(xiàn)少量沉淀,屬于正?,F(xiàn)象,不會影響使用效力。
1.2 細(xì)胞的消化可以直接用胰酶溶液,但常使用胰酶-EDTA溶液,因為EDTA是一種II價金屬離子螯合劑,
【①】:胰酶用于細(xì)胞傳代的工作濃度范圍為0.025%-0.5%,具體濃度的選擇主要受胰酶活性、孵育時間和細(xì)胞系類型幾個方面影響。若用過高濃度消化過長時間,會破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),進而殺死細(xì)胞。當(dāng)對使用濃度把握不大,建議先使用低濃度消化,慢慢的摸索出合適的工作濃度。
【注②】:胰酶-EDTA溶液的配制(僅作參考,根據(jù)需要的實際胰酶濃度來調(diào)整)
無Ca2+、Mg2+及酚紅的平衡鹽溶液 | 485ml |
胰酶儲存液(2.5%,w/v) | 10 ml |
EDTA溶液(2%,w/v) |
|
2. 貼壁細(xì)胞消化(培養(yǎng)板)【詳見maokangbio】
注意事項
1)胰蛋白凍干粉產(chǎn)品常遇到的活性定義及其轉(zhuǎn)換,
1 BAEE Unit:在25℃,pH 7.6 的條件下,以BAEE為底物,3.2 ml的反應(yīng)體系中,A253吸光值每分鐘會發(fā)生0.001的變化即為一個酶活單位。
1 TAME Unit: 在25℃,pH 8.2,0.001M Ca2+條件下,每分鐘水解 1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester(TAME)的用量。
1 USP Unit:在條件下,每分鐘引起吸光值發(fā)生0.003的變化的樣品活性。
1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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MX2003-100ML | Trypsin (0.25%), Phenol Red 胰酶溶液(0.25%),含酚紅 | 100ml | 110 |
MX2004-100ML | Trypsin-EDTA (0.25%), Phenol Red 胰酶-EDTA溶液(0.25%),含酚紅 | 100ml | 120 |
MX2005-100MG | Trypsin, TPCK Treated 胰蛋白酶(TPCK處理)(組織培養(yǎng)級) | 100mg | 1012 |
MX2006-100MG | Trypsin, TPCK Treated 胰蛋白酶(TPCK處理)(蛋白測序級) | 100mg | 299 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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Trypsin 1:250 豬源胰蛋白酶1:250 細(xì)胞分離與流式分析
Trypsin 1:250 豬源胰蛋白酶1:250 細(xì)胞分離與流式分析