HB101大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞(熱激法)
簡(jiǎn)要描述:
HB101大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞(熱激法):HB101菌株是大腸桿菌K12×B的雜交菌株,也是Stbl3的原始菌株。菌株含recA13突變,能有效抑制長(zhǎng)末端重復(fù)片段的重組,降低了錯(cuò)誤重組的頻率。HB101菌株適用于克隆、亞克隆和放大應(yīng)用。適用于不需要藍(lán)白斑篩選的載體。
產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-21
HB101 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品標(biāo)簽:
Stbl3;Stbl2;HB101;Stable;Direct repeats 正向重復(fù)片段;Retroviral sequences 逆轉(zhuǎn)錄病毒序列;
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
MF2322-1000UL | HB101 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl | 280 |
MF2322-5000UL | HB101 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 50×100μl | 1280 |
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產(chǎn)品組分:
組分編號(hào) | 組分名稱(chēng) | 貨號(hào)(規(guī)格) | |
MF2322-1000UL | MF2322-5000UL | ||
MF2322-A | HB101 Competent Cell | 10×100μl | 50×100μl |
MF2322-B | Control Plasmid puC19, 10 pg/µl | 10μl | 10μl |
菌株描述
HB101菌株是大腸桿菌K12×B的雜交菌株,也是Stbl3的原始菌株。菌株含recA13突變,能有效抑制長(zhǎng)末端重復(fù)片段的重組,降低了錯(cuò)誤重組的頻率。含hsdS20(rB- mB-)限制缺陷基因型,能阻止內(nèi)源性限制酶對(duì)克隆DNA的切割,增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性。但不含endA1突變,其編碼的核酸內(nèi)切酶I可能降解克隆DNA,因此質(zhì)粒提取過(guò)程中盡量使用高純質(zhì)粒提取試劑盒或經(jīng)蛋白液處理以去除酶污染的干擾。此菌株攜帶鏈霉素抗性。菌株不含lacZ?M15,無(wú)法提供來(lái)自pUC或類(lèi)似載體上β-半乳糖苷酶基因的α-互補(bǔ)序列,因此不能進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。HB101菌株適用于克隆、亞克隆和放大應(yīng)用。適用于不需要藍(lán)白斑篩選的載體。
HB101菌株基因型:F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20((strR) glnV44 λ-
產(chǎn)品描述
本品是HB101菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的感受態(tài)細(xì)胞,可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>>5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個(gè)月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。
注意事項(xiàng)
1) 感受態(tài)細(xì)胞必須用干冰運(yùn)輸。感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)在-80℃保存,不可反復(fù)凍融且放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)減低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2) zui號(hào)在冰上融化感受態(tài)細(xì)胞。
3) 轉(zhuǎn)化高濃度質(zhì)粒或高效連接產(chǎn)物需相應(yīng)減少zui終涂板的菌量。
4) 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時(shí),需在相應(yīng)溫度及無(wú)菌條件下進(jìn)行。
5) 為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功,可保留部分連接反應(yīng)液以重新轉(zhuǎn)化,將損失降到zui低。
6) 產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10 pg/μl),供對(duì)照實(shí)驗(yàn)用。
7) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在無(wú)菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進(jìn)行】【詳見(jiàn)懋康MKBio整理】
附表1 固體和液體LB培養(yǎng)基配方
組分Component | LB(液體)/升 | LB(固體)/升 |
胰蛋白胨 Tryptone | 10g | 10g |
酵母提取物 Yeast extract | 5g | 5g |
氯化鈉 NaCl | 10g | 10g |
1N NaOH | 調(diào)整pH至7.0 | 調(diào)整pH至7.0 |
瓊脂 Agar | / | 15g |
附表2 固體和液體2-YT培養(yǎng)基配方
組分Component | 2YT(液體)/升 | 2YT(固體)/升 |
胰蛋白胨 Tryptone | 16g | 16g |
酵母提取物 Yeast extract | 10g | 10g |
NaCl | 5g | 5g |
1N NaOH | 調(diào)整pH至7.0 | 調(diào)整pH至7.0 |
瓊脂 Agar | / | 15g |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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